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PCR黏性光學(xué)封板膜用途及使用方法
關(guān)于“PCR黏性光學(xué)封板膜",這是一種專門為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵耗材。下面本生將為您詳細(xì)解釋其特點(diǎn)、用途和使用方法。
一、 核心功能與特點(diǎn)
顧名思義,這種封板膜結(jié)合了三大核心功能:
光學(xué)特性
高透光率:膜體本身由高度透明的聚合物(如聚丙烯或特種復(fù)合薄膜)制成,確保在實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)過(guò)程中,光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)能夠高效、準(zhǔn)確地采集熒光信號(hào),不會(huì)因膜材的遮擋或自身熒光而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
低自發(fā)熒光:這是最關(guān)鍵的特性。高質(zhì)量的光學(xué)膜經(jīng)過(guò)特殊處理,其自身產(chǎn)生的背景熒光(本底熒光)極低,可減少噪音,提高信噪比,保證數(shù)據(jù)的精確性和靈敏度。
黏性密封
強(qiáng)粘合劑層:膜的邊緣涂有生物相容性的壓敏膠。其作用是提供牢固的氣密性密封。
防止蒸發(fā):在PCR的熱循環(huán)過(guò)程中(通常涉及95℃以上的高溫),反應(yīng)體系中的液體會(huì)劇烈蒸發(fā)。黏性密封能有效防止蒸發(fā)和冷凝,避免反應(yīng)體系體積和濃度的變化,這對(duì)于實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性至關(guān)重要。
避免污染:密封功能同時(shí)防止了樣本間的交叉污染以及外界污染物進(jìn)入孔內(nèi)。
封板形式
專為標(biāo)準(zhǔn)96孔板、384孔板或其他多孔板設(shè)計(jì),可一次性密封整個(gè)板子,適用于高通量實(shí)驗(yàn)。
二、 主要應(yīng)用場(chǎng)景
實(shí)時(shí)熒光定量PCR
數(shù)字PCR
其他需要精確光學(xué)檢測(cè)且防止蒸發(fā)的微孔板實(shí)驗(yàn)。
三、 使用方法(標(biāo)準(zhǔn)步驟)
準(zhǔn)備:
完成PCR反應(yīng)體系的配制,并將液體轉(zhuǎn)移至PCR多孔板中。
從包裝中取出封板膜,切勿用手直接觸摸膜的中央?yún)^(qū)域,以免手上的油脂、灰塵或核酸酶污染膜的光學(xué)面。應(yīng)手持膜的邊緣。
檢查膜是否有破損或污染。
貼合:
將封板膜有粘性的一面對(duì)準(zhǔn)PCR板,先從一端(例如長(zhǎng)邊的一端)對(duì)齊并貼合。
然后用手指或壓板工具,從已貼合的一端緩緩向另一端推進(jìn),確保膜平整地、無(wú)氣泡地覆蓋在板子上。這個(gè)操作類似于給手機(jī)貼膜,目的是排除氣泡。
壓緊:
使用專用的板膜滾輪用力、均勻地滾壓整個(gè)封板膜表面,特別是每個(gè)孔之間的區(qū)域和板的四周邊緣,確保粘合緊密,形成有效密封。
重要:如果沒(méi)有滾輪,可以用手指用力按壓,但務(wù)必確保每個(gè)孔周圍都密封到位。密封不嚴(yán)是導(dǎo)致蒸發(fā)和交叉污染的常見(jiàn)原因。
上機(jī)運(yùn)行:
將密封好的PCR板放入實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中進(jìn)行熱循環(huán)反應(yīng)。儀器的光學(xué)蓋會(huì)直接壓在封板膜上進(jìn)行熒光掃描。
移除:
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,從儀器中取出板子。通常從一角小心地揭開(kāi)封板膜并丟棄。注意:反應(yīng)后的板內(nèi)可能含有擴(kuò)增產(chǎn)物,是重要的污染源,操作時(shí)應(yīng)戴手套,并將廢棄的板子和封板膜作為生物危險(xiǎn)廢物處理。
總結(jié)
PCR黏性光學(xué)封板膜是為qPCR實(shí)驗(yàn)“量身定做"的密封解決方案。 它地平衡了優(yōu)異的光學(xué)透性和可靠的氣密密封性兩大核心需求,是確保q實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠的基礎(chǔ)保障。在選擇時(shí),務(wù)必確認(rèn)其適用于qPCR且具有低自發(fā)熒光的特性。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),如需具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌商。
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